梵蒂冈博物馆位于梵蒂冈城内，梵蒂冈博物馆是世界上最伟大的博物馆之一，其中的藏品是多个世纪以来罗马天主教会收集、积累的成果。2013年底止，博物馆当年的参观人数达到5,459,000人次。16世纪时，教皇儒略二世创建了博物馆。梵蒂冈博物馆的起源可以追溯到500年前购买的一座大理石雕像。这座名为拉奥孔与儿子们的雕像于1506年1月14日在圣母大殿附近的一个葡萄园里发掘出来。教皇儒略二世派朱利亚诺•达•桑迦洛（Giuliano da Sangallo）和米开朗琪罗去查看发掘成果。在他们的推荐下，教皇当机立断从葡萄园主那里买下了雕像。在发掘出雕像整一个月后，教皇就在梵蒂冈向公众进行了展示。著名的馆内建筑有西斯廷礼拜堂、尼各老小堂。主要展馆有：庇奥-克里门提诺博物馆（Museo Pio-Clementino）：以希腊、罗马时代的雕刻为主，《拉奥孔与儿子们》陈列其中；格里高利-伊特鲁斯博物馆（Museo Gregoriano-Etrusco）：以公元前4世纪以前的收藏品为主；拉斐尔画室（Stanze di Raffaelo）：由拉斐尔及其徒弟们的壁画装饰的馆室，其中最著名的作品是《雅典学院》；梵蒂冈画廊（Pinacoteca Vaticana）：主要收藏绘画作品，包括拉斐尔、达芬奇和卡拉瓦乔等人的名作。地图廊：意大利各地全图，教皇格雷戈里十三世委派佩鲁贾的Ignazio Danti绘于墙上。该画廊位于Belvedere庭院的西侧，长120米。Ignazio Danti 花了三年（1580—1583）完成了40幅画作。画廊天花上的装饰是一群风格主义画家（如Cesare Nebbia和Girolamo Muziano）的作品。
著名的藏品有：卡拉瓦乔的几幅绘画，包括《基督下葬》（1602—1603）；列奥纳多•达芬奇的肖像画《在旷野的圣哲罗姆》（St. Jerome in the Wilderness）；弗拉•安杰利科、乔托、 拉斐尔、尼古拉•普桑和提香的绘画作品；原放置于圣若望拉特朗大殿的红色大理石教宗宝座；古罗马雕塑、墓碑和碑铭，包括卢基乌斯•科尔内利乌斯•西庇阿•巴尔巴图斯的墓志铭；拉斐尔的大量作品，包括《雅典学院》；雕塑有： 拉奥孔与儿子们、第一门的奥古斯都像、观景殿的阿波罗。
梵蒂冈博物馆是罗马最热门的景点之一，所以如果你打算进入参观的话最好提前排队。梵蒂冈博物馆可谓是珍宝的圣殿，世界各地的珍宝汇集于此，如果你想要把所有的展厅都看完可能就需要好几天的时间，所以最好提前做好功课，因为也许在你不经意间就会错过。

特殊入场时间
在博物馆内用早餐
最早可进入博物馆的时间是早上7:15。进去之后先去庭院用早餐，早餐品种丰盛，饮品包括酸奶果汁咖啡等，食物包括鸡蛋面包曲奇煎饼等，以及各类水果。用餐半个小时之后工作人员会分发audioguide，8点左右即可进博物馆参观。此时段的亮点在于人流量极少，在开馆前一个小时可以享受良好的欣赏艺术作品体验。
需要提前在网上链接预定博物馆门票+早餐的套票，原价65欧，学生折扣57欧。链接：https://biglietteriamusei.vatican.va/musei/tickets/do?action=booking&codiceLivelloVisita=34&step=1
注：不是每天都有。

夏日夜晚每个星期五从19点到23点可以参观梵蒂冈博物馆（最后入场时间为21：30)。这个时段内博物馆内可参观：庇奥-克里门提诺博物馆，埃及博物馆，长廊（烛台，挂毯和地图），拉斐尔画室，西斯廷礼拜堂等等。
必须网上预约。
此段时间的亮点在于有现场表演，一般20：30开始，时长60分钟左右。无需再购票，地点是Cortina della Pigna。
详细的节目单：http://www.museivaticani.va/1_CommonFiles/pdf/aperture_notturne_2015_programma.pdf （意大利语）
注：不是每晚都有。
(持有罗马年票metrebus card和罗马月卡èRoma的人可享受优惠价17欧元和无需排队优先权，此项只限于夏日夜晚入场）